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APPORT DE LA CYTOMETRIE DE FLUX DANS LE DIAGNOSTIC DES LA GRANULEUSES EXPERIENCE TUNISIENNE

APPORT DE LA CYTOMETRIE DE FLUX DANS LE DIAGNOSTIC DES LA GRANULEUSES EXPERIENCE TUNISIENNE. Dr Emna GOUIDER BELHADJALI. Diagnostic immunophénotypique des leucémies aiguës au Service d’Hématologie Biologique de l’HAO: Mai 2005 Cytomètre Beckman Coulter XL MCL Triple marquage

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APPORT DE LA CYTOMETRIE DE FLUX DANS LE DIAGNOSTIC DES LA GRANULEUSES EXPERIENCE TUNISIENNE

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  1. APPORT DE LA CYTOMETRIE DE FLUX DANS LE DIAGNOSTIC DES LA GRANULEUSESEXPERIENCE TUNISIENNE Dr Emna GOUIDER BELHADJALI

  2. Diagnostic immunophénotypique des leucémies aiguës au Service d’Hématologie Biologique de l’HAO: Mai 2005 • CytomètreBeckman Coulter XL MCL Triple marquage Prélèvement de MO • Gating des blastes: Intensité du CD45/SSC

  3. Examen cytologique+++  • Etude immunophénotypique • Panel Ac : • Ac immaturité • Ac myéloïdes, • Ac lymphoïdes B et T • Contrôles isotypiques+++ • « Contrôles positifs »

  4. Score d’EGIL Il faut au moins un score de deux dans une lignée pour affirmer l'appartenance des cellules à cette lignée

  5. Septembre 2005 à Septembre 2008 • 200 LAM ont été diagnostiquées (70% de l’Hôpital Aziza Othmana)

  6. RESULTATS • Fréquence des différents marqueurs: • MPO 93% • CD13 80% • CD33 67% • CD15 42% • CD65 40% • CD117 39% • HLA DR 68% • CD34 49% • Expression panmyéloïde : 8,5% • Coexpression CD56 15,5% • Expression marqueurs lymphoïdes: T>B

  7. LAM 0 • 1% des cas • Cytologie peu évidente LAL? LAM? • MPO en cytochimie négative • Score myéloïde en IP • HLA-DR/CD34 +

  8. LAM1- LAM2 • Diagnostic cytologique+++ • Marqueurs aberrants? • CD56

  9. Diagnostic LAM3 /LAM3v • Thérapeutique et Pronostic différents des autres LAM • 16% des cas • Signal SSC intense • CD34–/HLA-DR– : 27/32 (84,3%) • Expression du CD2: 7 /9 cas M3v • Cytologie souvent évidente mais parfois… • Corrélation statistiquement significative LAM HLA-DR-/CD34- Evoquer la LAM3

  10. LAM4/LAM5 • CD14+ 60%M4 et 36%M5 [27-63% M4 et 42 à 88%M5] • CD4 77%M4 et 45%M5 [80-89% M4 et 50-92% M5] • Zone de migration des blastes

  11. LAM6 • 2,5% des cas • Cyto+++ • GPHA • CD36

  12. LAM7 • CD61 100% • CD41 34% • CD42 67%

  13. Valeur pronostique de l’immunophénotypage? • 52 LAM (M3 exclues) • 18-55ans • HLA-DR- (/ HLA-DR+) GB NS CIVD (27%vs 4,8%) échec d’induction (36%vs21%) NS caryotype souvent normal • CD34- (/CD34+) GB et CIVD (17%vs 0%) échec d’induction (NS) caryotype normal

  14. LAM CD7+ Echec induction (57%vs 15%) Statistiquement significatif LeukRes. 2007 Feb;31(2):157-62. Epub 2006 Jul 11. Links CD7 expression predictspoordisease free survival and post-remissionsurvival in patients with acute myeloidleukemia and normal karyotype.

  15. CONCLUSION • L’immunophénotypage: • Confirme l’origine myéloïde (score d’EGIL) • Exclusion des LA biphénotypiques, LAL T avec grains….. • Diagnostic LAM0, LAM4-5, LAM7 • Marqueurs aberrants • Valeur pronostique HLADR, CD34, CD7 • Maladie résiduelle ……

  16. REMERCIEMENTS • Dr Raouf Hafsia • Laboratoire Médibio Instrument • Mahbouba Kooli • Dr Naouel Ben Salah • Dr Wijdène El Borgi

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