1 / 31

Genetička toksikologija

Genetička toksikologija. Mehanizmi nastajanja genetskih oštećenja Eksperimentalni modeli za otkrivanje Procena rizika po zdravlje ljudi Genotoksikologija proučava uticaj fizičkih i hemijskih agenasa na proces prenošenja naslednih osobina vodeći računa o moguć. posledicama po zdravlje ljudi.

byrd
Download Presentation

Genetička toksikologija

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript


  1. Genetička toksikologija • Mehanizmi nastajanja genetskih oštećenja • Eksperimentalni modeli za otkrivanje • Procena rizika po zdravlje ljudi • Genotoksikologija proučava uticaj fizičkih i hemijskih agenasa na proces prenošenja naslednih osobina vodeći računa o moguć. posledicama po zdravlje ljudi

  2. Vrste genetskih oštećenja • Genske mutacije • Hromozomske aberacije (strukturne) • Promene broja hromozoma (aneuploidija)

  3. Supstance koje izazivaju genska oštećenja • Mutageni-izazivaju genske mutacije • Klastogeni-menjaju strukturu hromozoma • Aneugeni-menjaju broj hromozoma

  4. Genske mutacije • Genske ili tačkaste mutacije promene u redosledu baznih parova u DNK koje su ograničene na jedan ili mali broj baznih parova • Mutageneza promena DNK sekvence gena i ulazak u proces nasledjivanja • DNK se formira iz dve purinske(gvanin i adenin) i dve pirimidinske baze(citozin i timin) pri čemu se gvanin iz jednog lanca uvek vezuje za citozin iz drugog lanca DNK a adenin za timin

  5. Vrste genskih mutacija • Tranzicija- ako se promena u redosledu odnosi na isti tip baza (adenin umesto gvanina ili citozin umesti timina) • Transverzija-ako promena obuhvata purinsku bazu umesto pirimidinske • Spontano-pod uticajem gena u molekularnim procesima koji su uključeni u replikaciju i očuvanje DNK • Pod uticajem mutagena iz spoljašnje sredine poremećaji u sintezi i rasporedu aminokiselina ili stvaranje nefunkcionalnih gena

  6. Posebni tipovi genskih mutacija • Vanfazne mutacije(“frameshift”)-kod kojih dolazi do dodavanja (insercije) ili gubljenja (delecije) jednog ili dva para baza u molekul DNK (nefunkcionalni geni) • Fazne mutacije-dodavanje ili gubljenje grupa od po tri bazna para-značajna promena RNK posle mesta mutacije • Ponavljanje tripleta-ponavljanje grupa od po tri baze i to u pojedinačnim genima( genske bolesti miotonična distrofija Huntington-ova bolest

  7. Hromozomi čoveka • Kod ljudi postoji 46 hromozoma ili 23 para • Označeni su brojevima od 1 do 22 plus dva koja označavaju pol (XX ženski) I (XY muški)-normalan kariotip • Različite ćelije istog organizma i različite jedinke iste vrste imaju isti broj hromozoma osim polnih ćelija koje imaju polovinu broja hromozoma u odnosu na somatske ćelije

  8. Hromozomske aberacije • Promene u strukturi hromozoma koje se mogu posmatrati svetlosnim mikroskopom • Te promene podrazumevaju prekidanje hromozoma do koga može doći na jednom ili oba hromatida i grupisanje prekinutih delova hromozoma • Aberacije tipa hromozoma-kada se ćelije izlože zračenju pre replikacije DNK-obe hromatide • Aberacije tipa hromatida-izlaganje ćelija posle replikacije DNK većinske aberacije-jedna hromatatida

  9. Vrste hromozomskih aberacija • Homologi hromozomi su jednaki po broju i redosledu gena koje nose • Aberacije-promene u broju ili redosledu gena u hromozomima • Delecija i duplikacija-promene u broju • Inverzija i translokacija-promene u lokacij • Strukturne hromatidne i hromozomske promene nastaju posle pojave jednog ili nekoliko prekida i ponovnim prespajanjem raskinutih delova

  10. Hromozomske aberacije • Delecija-gubitak naslednog materijala kraćih ili dužih delova hromozoma(pojedini sindromi i vrste maligniteta) • Duplikacija-povećanje naslednog materijala prilikom adicije deletiranog fragmenta na homologi hromozom(ozbiljni fenotipski poremećaji) • Translokacija-premeštanje delova nehomologih hromozoma-promena lokacije određenih segmenata hromozoma(ti delovi jednog hrom. mogu se vezati za kraj drugog-umetnuti u drugi-kod istovremene terminalne delecije dva nehom. hrom. mogu zameniti mesta i ponovo se vezati za hromozome • Inverzija-označava nastanak dva prekida na hromozomu pri čemu se segment između njih okreće za 180º i ponovo vezuje za odvojene delove hromozoma

  11. Aneuploidija • Aneuploidija-gubitak ili dobijanje jednog ili više hromozoma • Poliploidija-odnosi se na kompletnu grupu hromozoma iz jedne ćelije • Kod ljudi normalan diploidni broj hromoz. 46-osobe sa 45 ili 47 aneuploidi sa 69 triploidi(poliploidi) • Aneuploidi kojima nedostaje jedan hromozom su monozomi-jedan višak trizomi • Down-ov sindrom-mongolizam trizomija 21 hrom. može i fatalno • Mentalna retardiranost kongenitalna obolenja srca češća pojava nekih oblika leukemije oslabljen imunološki status organizma rana pojava Alzheimer-ove bolesti

  12. Zdravstveni značaj mutacija • Genetski poremećaji • Pojava maligniteta(kancerogeneza) • Mutacije u polnim ćelijama • Mutacije u somatskim ćelijama

  13. Mutacije u polnim ćelijama • 15% trudnoća-spontani pobačaj polovina usled hromozomskih poremećaja • 0.6% rođene dece aneuploidija-trizomija (Down-ov sindrom) inverzije i translokacije molekularna analiza ukazuje na zamenu baznih parova(citozin-gvanin) ređe deleci. • Cistična fibroza i fenilketonurija se nasleđuju od prethodnih generacija • 6% novorođene dece kongenit.poremećaje(bolesti srca hipertenzija dijabet) • Genske mutacije u hromozomu 7-cistična fibroza gojaznost manja produkcija hormona rasta • Hromozom 11 dijabetes-hromozom X mentalna retardiranost nesposobnost razlikovanja boja hemofilija • Hromozom 1 maligni melanom kancer prostate • Hromozom 13 kancer dojke pankreasa i retinoblastom • Hromozom 14 neki oblici leukemije

  14. Mutacije u somatskim ćelijama • Mutacija-trajna nasledno prenosiva promena u genetskom materijalu • Kancer-lokalna nekontrolisana deoba ćelija • Korelacija između mutagenosti i kancerog. hemijskih jedinjenja • Sindrom nestabilnosti hromozoma i nedost sposobnosti za reparaciju DNK –povećan rizik za kancer

  15. Savremena teorija onkogenosti • Aktivacija onkogena i inaktivacija tumor supresorskih gena uzrok pojave tumora • Kancer bubrega debelog creva mozga dojke pluća mokraćne bešike • Aktivacija onkogena tačkastom mutacijom ili translokacijom hromozoma • Inaktivacija tumor supresorskih gena mutacijom tipa delecije

  16. Kancerogeneza • Inicijalna faza-ireverzibilna indukcija neke genske promene • Faza promocije-dolazi do deobe iniciranih ćelija-benigni tumor-papilom • Faza progresije-nastavlja se proliferacija ćelija- genski poremećaji i metastaze

  17. Mehanizmi nastajanja genskih oštećenja • Mutageneza-promene u strukturi DNK pod uticajem fizičkohemijskih i bioloških agenasa i reparatornih procesa DNK • Reakcija elektrofila sa funkcionalnim grupama DNK-kovalentni konjugati • Tačkaste mutacije hromozomske aberacije aneuploidija • Kancerogeni-metilacija alkilacija etilacija DNK • Endogeni kompleksi sa DNK-reparacija DNK • Nekovalentno vezivanje-umetanjem molekula mutagena između baznih parova DNK-adinelacijom(vezivanjem vodoničnim vezama sa spoljne strane DNK-aromatični policiklični ugljovodonici akridinske boje neki antibiotici • Mehanizmi aneuploidije i poliploidije-agensi koji sprečavaju deobu ćelija-dodatna replikacija hromozoma-prerana deoba centromera-neodgovarajućeg sparivanja homologih hromozoma-gubitak hromozoma • Aneugene supstance mogu istovremeno biti i klastogene i mutagene • Aneugeni-kolhicin diazepam vinblastin hloral hidrat kadmijum hlorid

  18. Osnovni genotoksični testovi • Testovi za detekciju genskih mutacija • Testovi za otkrivanje hromozomskih promena • Testovi za otkrivanje efekata na nivou DNK

  19. Testovi za detekciju genskih mutacija • Test reverznih mutacija kod Salmonela Typhimurium(tzv. Ames-ov test) • Test reverznih mutacija kod Escherichia coli • Test genskih mutacija u kulturi ćelija sisara • Test polno vezanih recesivnih letalnih mutacija kod Drosophila melanogaster • Test genskih mutacija kod Saccharomyces cervisiae • Spot test kod miša

  20. Testovi za detekciju genskih mutacija • Jednostavni-brzi-reproducibilni-jeftini-pouzdani • Bakterijski i gljivični testovi nepouzdani za ljude • Spot test kod miša-test u kulturi ćelija sisara- test na vinskoj mušici- pouzdaniji • Problem metaboličke aktivacije supstance

  21. Testovi za otkrivanje hromozomskih promena • In vitro citogenetski test • In vivo citogenetski test • Mikronukleus test • Test dominantno letalnih mutacija • Test naslednih translokacija • Citogenetski test na germinativnim ćelijama sisara

  22. Testovi za otkrivanje hromozomskih promena • Direktno mikroskopom se posmatraju efekti kao što su aberacije hromatida i hromozoma-ćelije sa malim brojem hromozoma ili većim hromozomima kao što su limfociti periferne krvi • Ispitivanje klastogenog efekta kod ćelija sisara u kulturi-osetljivi jednostavni • In vivo testovi prednost-normalan metabolizam eliminacija supstance reparacija DNK ćelijska proliferacija(ćelije koštane srži glodara-brojanjem mikronukleusa u polihromatskim eritrocitima-analizom hromozoma u metafizi • Za ispitivanje promena u hromozomima germinativnih ćelija-poslednja tri testa

  23. Testovi za otkrivanje efekata na nivou DNK • Oštećenje i reparacija DNK-neredovna sinteza DNK • Test mitotske rekombinacije kod Saccharomyces cervisiae • Izmena sestrinskih hromatida in vitro

  24. Testovi za otkrivanje efekata na nivou DNK • Prekidi u lancu DNK ili stvaranje kompleksa sa ispitivanom supstancom mogu se direktno meriti savremenim metodama • Praćenje reparacije i neplanirane sinteze DNK • Diferencijalnim bojenjem hromatida- test sestrinske izmene

  25. Registracija lekova u SAD-Japanu i Evropskoj uniji • Tri testa-skraćen program ispitivanja • Ispitivanje mutacija na bakterijama • In vitro citogenetsko ispitivanje promena na hromozomima ili ispitivanje po metodi mutacija timidin kinaze mišjeg limfoma • In vivo ispitivanje oštećenja hromozoma-hematopoetične ćelije glodara

  26. Hemijski genotoksični agensi • Supstance prirodnog porekla • Jedinjenja koja se koriste ili nastaju u industrijskim procesima • Farmaceutski proizvodi • Pesticidi • Genotoksični agensi u hrani i vodi

  27. Supstance prirodnog porekla • Alkaloidi-pirolizidinski alkaloidi široko rasprostranjeni u prirodi mutagana i kancerogena svojstva • Kofein-purinska baza klastogen efekat • Alfatoksin B1-proizvod metabolizma gljivice Aspergillus flavus-mutagena i kancerogena svojstva

  28. Jedinjenja koja se koriste ili nastaju u industrijskim procesima • Najbrojnija grupa • Opasnost za radnike u proizvodnji lokalno stanovništvo-ako ulaze u satav proizvoda za znatno veću populaciju • Industrijski alkilirajući agensi-organski rastvarači-organska jedinjenja metala-teške metale-zagađivače vode i vazduha • Mutageni-aldehidi(formaldehid-acetaldehid-akrolein) epoksidi u izradi celuloznih vlakana i plastičnih masa-neorganska i organska jedinjenja arsena nikla olova hroma kobalta itd

  29. Farmaceutski proizvodi • Antibiotici-streptomicin bleomicin doksorub • Citostatici-metotreksat ciklofosfamid vinkristin vinblastin • Sredstva sa dejstvom na CNS- narkotici antipsihotici-hlopromazin • Anestetici-haloton trihloretilen • Kontraceptivna sredstva • Kozmetička sredstva-boje za kosu(aromatični amini i razni aditivi)

  30. Pesticidi-podela prema mutagenosti po EU • Poznati mutageni • Mogući mutageni • Potencijali mutageni • Alkilirajući agensi slobodni radikali • Organska halogena jedinjenja čijom biotransformacijom nastaje vinil hlorid • Organohlorna jedinjenja-DDT NAPUŠTEN sporo se matabolišu dugo zadržavaju-genotoksičnost

  31. Genotoksični agensi u hrani i vodi • Nitrati i nitriti-konzervansi mesa i mesnih prerađevina-metaboliti opasni etilnitrozourea • Veštački zaslađivači-saharin razmena sestrinskih hromatida i aberacije hromoz. • Mikotoksini i proizvodi metabolizma nekih bakterija • Nitrozamini i derivati policikličnih aromatičnih ugljovodonika-benzopiren-nepotpuno sagorevanje organskih materija namirnice biljnog i životinjskog porekla • Voda-posle primene u poljoprivredi-iz industrijskih procesa-proizvodi raspadanja organskih materija • Hlorinacija vode-hlorfenoli i trihlormetan potentni mutageni

More Related