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Diferenciación celular. Fenotipos dinámicos. Contenidos. Desarrollo embrionario Genes y desarrollo embrionario Estructura y función en fenotipos celulares Miogénesis como modelo Diferenciación y comunicación celular Diferenciación de células troncales. Desarrollo embrionario.
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Diferenciación celular Fenotipos dinámicos
Contenidos • Desarrollo embrionario • Genes y desarrollo embrionario • Estructura y función en fenotipos celulares • Miogénesis como modelo • Diferenciación y comunicación celular • Diferenciación de células troncales
Estudio del desarrollo embrionario y la diferenciación celular • Organismos usados como modelo de estudio: • Plantas: • Arabidopsis thaliana • Invertebrados: • Mosca de la fruta Drosophila melanogaster • Gusano nemátodo Caenorhabditis elegans • Erizos de mar (varias especies) • Vertebrados: • Rana Xenopus laevis • Rata Rattus rattus
Experimentos en Drosophila melanogaster Normales Mutante “ojo en pata” Mutante bithórax Mutante antennapedia
Resumen • La diferenciación involucra varios procesos: • Activación de genes de segmentación • Activación de genes homeóticos
Problema de fondo = ADN ≠ Fenotipos
Experimento: método • Obtención de ADNc del gen A, desde células hepáticas (hígado) • Marcación de ARNm en células hepáticas, renales y cerebrales • Hibridación de ADNc del gen A con ARNm de los 3 tipos de células • Contabilizar la radiactividad total de los híbridos desde pocillos individuales para cada tipo de ARNm
Experimento: resultado Conclusión: Aún cuando comparten el ADN, las células de un mismo organismo transcriben distintos ARNm Hipótesis más probable: El fenotipo de cada célula depende de la síntesis de proteínas diferenciales
Problema: ¿hay genes específicos que controlan la miogénesis? Micrografía de miogénesis en embrión humano
Grupo metilo (-CH3) Antecedente: Inhibición de la transcripción mediante metilación Metilasa
Grupo metilo (-CH3) Antecedente: Inhibición de la metilación mediante 5-azacitidina Metilasa 5-Azacitidina
Experimento 1: Obtención de mioblastos a partir de fibroblastos
Experimento 2: Rastreo de los genes modificados por la 5-azacitidina
(Autorradiografía) Ejemplo 2: marcación selectiva de células secretoras de TSH en la hipófisis Ejemplo 1: comprobación de la vía RER – Golgi - Exocitosis Principales isótopos usados: 32P, 131I, 35S, 14C, 45Ca y 3H
Resumen • La diferenciación involucra varios procesos: • Activación de genes de segmentación • Activación de genes homeóticos • Metilación diferencial