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Analyses en multiplex

Analyses en multiplex. Le Bio-Plex Luminex. Bio-Plex. Analyse simultanée de nombreuses substances sur de faibles volumes d’échantillons (30ul de plasma, surnageants, etc). 4 grandes familles d’applications : Le Bio-Plex ( www.luminexcorp.com ) est un système ouvert :

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Presentation Transcript

  1. Analyses en multiplex Le Bio-Plex Luminex

  2. Bio-Plex • Analyse simultanée de nombreuses substances sur de faibles volumes d’échantillons (30ul de plasma, surnageants, etc). • 4 grandes familles d’applications: • Le Bio-Plex (www.luminexcorp.com) est un système ouvert : - réactifs commerciaux - vos propres réactifs basés sur les billes de la société Luminex

  3. Champs d’applications - réactifs commerciaux • Cell biology • Phosphoprotein assays (www.bio-rad.com) • Transcription factor assays (www.biosource.com, linco: www.labodia.com) • Hormones • Cytokines (inflammation, adipokines) (www.bio-rad.com, www.labodia.com) • Endocrine hormones (www.labodia.com) • Pituitary hormones (www.labodia.com) • Metabolic markers • cardiovascular diseases (www.labodia.com) • bone metabolism (www.labodia.com) • apolipoproteins (www.labodia.com) • apoptosis (www.labodia.com) • Nucleides • RNA assay (www.panomics.com) • Des réactifs commerciaux sont disponibles pour: l’homme, le singe, le rat, la souris, le chien.

  4. Panel et prix : mouse cytokines Note: de nombreuses autres possibilités sont proposées par les sites commerciaux

  5. Panel et prix : mouse bone markers Note: de nombreuses autres possibilités sont proposées par les sites commerciaux

  6. Panel et prix : mouse endocrine Note: de nombreuses autres possibilités sont proposées par les sites commerciaux

  7. Panel et prix : human gut hormones Notes: de nombreuses autres possibilités sont proposées par les sites commerciaux.

  8. Nombre de tests par kit Le Bio-Plex ne peut être utilisé au coup par coup. Son unité de travail est une plaque de 96 puits. De ces 96 puits, 20 sont nécessaires à l’étalonnage et à la validation de chaque dosage. 1 kit = 1 plaque = 38 échantillons en doubleou76 échantillons en simple Faut-il mesurer systématiquement les échantillons en double? Oui si vous êtes en phase finale d’un projet et si vous devez quantifier très précisément des variations de concentrations très faibles Non si vous disposez de doubles biologiques ou si vous êtes en phase exploratoire

  9. Planification de l’expérience

  10. Nature des échantillons • En recherche clinique humaine • Plasma , sérum, urine, expectoration , LCR, Liquide bronchoalvéolaire, secrétions vaginales , liquide de ponction articulaire • En recherche fondamentale • Plasma, sérum, urine, divers liquides histologiques, extrait de tissus, culture cellulaire, milieu de culture. • (liste non limitative) • Jamais de solvants organiques, détergents < 2 %

  11. Prélèvements des échantillons et volumes • Sang : préférer systématiquement le plasma EDTA à toute autre forme de collecte • Attention aux sérums lipémiques, hémolysés ou visqueux et aux protéines instables dans le plasma (ACTH , glucagon, GLP-1, etc: prélever le sang en présence d’inhibiteurs de protéases). • Bio-Plex = petits volumes pour un grand nombre d’analyses • 30 µl de plasma pour 30 cytokines humaines ou 22 cytokines de souris • Attention : pour un dosage en double, fournir 75 µl de plasma à notre laboratoire

  12. Rendu des résultats • Les résultats sont sortis sur imprimante et sont transmis par e-mail sous forme de tableau Excel avec toutes les données utiles.

  13. Date Nom Groupe Nombre d’échantillons Nature des échantillons (plasma, surnageant etc.) Type de dosage Nature du projet (type de souris) Adresse email Demande d’analyses Formulaire à remettre avec les échantillons

  14. Conditions d’utilisation • La plate-forme propose divers dosages effectués sur plasma et milieu de culture à l’aide de kits commerciaux • L’unité d’utilisation est un kit complet soit 76 échantillons • La responsabilité de la plate-forme n’est pas engagée en cas de résultats douteux obtenus sur des échantillons incompatibles (hyperlipémiques hémolysés, visqueux etc…) ou des vices de fabrication des kits

  15. Contact Laborantine responsable : Marianne Carrard Superviseur de la plateforme : Frédéric Preitner Directeur de la plateforme : Bernard Thorens Jours : mardi jeudi vendredi 021/ 692 4136 labo génotypage ou 021/ 6923957 labo 2022 Mail to: marianne.carrard@unil.ch

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