1 / 17

Praktiká 5ZS enterobacteriaceae

Praktiká 5ZS enterobacteriaceae. Enterobacteriaceae – charakteristika, štruktúra, typy ochorení, odber materiálu – E. coli, Proteus sp., Klebsiella sp Mikroskopický dôkaz – E. coli podľa Grama, - dôkaz púzdra K. pneumoniae podľa Burriho

kata
Download Presentation

Praktiká 5ZS enterobacteriaceae

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript


  1. Praktiká 5ZS enterobacteriaceae • Enterobacteriaceae – charakteristika, štruktúra, typy ochorení, odber materiálu – E. coli, Proteus sp., Klebsiella sp • Mikroskopický dôkaz – E. coli podľa Grama, - dôkaz púzdra K. pneumoniae podľa Burriho • Kultivačný dôkaz – E. coli a K.pneumoniae na krvnom agare a Endovej pôde, - plazivý rast P. mirabilis – Raussov fenomén • Biochemický dôkaz - Enterotesty, - vyhodnotenie Enterotestu E. coli, Kl. Pneumoniae a P. vulgaris., - opakovanie biochemická pôda Hajn • Sérologický dôkaz – dôkaz antigénnej štruktúry neznámeho kmeňa – použitie polyvalentných a monovlaentných sér – sklíčková aglutinácia

  2. G- aeróbne paličky • 1) Fakultatívne anaeróbne fermentujúce paličky:Enterobacteriaceae - E. coli, Salmonella, Schigella, Enterobacter, Citrobacter, Serratia, Klebsiella, Proteus, Morganella, Providencia Vibrionaceae - Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas Campylobacter, Helicobacter • Najrozsiahlejšia, najheterogénnejši skupina medicínsky dôležitých baktérií • 27 rodov,102 druhov (95% medicínsky významných patrí do 25 druhov) - odlíšenie na základe DNA homológie, biochemických vlastností, sérologických reakcií, ATB citlivostí • Bežne prítomné v prírode (pôda, voda, rastliny) súčasť normálnej flóry čreva. • Obligátne patogénne(Yersinia pestis), podmienečne patogénne (Klebsiella, E. coli, Proteus) • Prenos zo zvieraťa (Salmonelly), od človeka - nosiča (S. typhi), endogénna infekcia (E.coli)

  3. Miesta infekcie • CNS - E. coli • IDC - Klebsiella, Enterobacter, E. coli • Septikémia - E. coli, Klebsiella, Enterobacter • GIT - Salmonella, Shigella, Yersinia, E.coli • IMC - E. coli, Proteus, Providencia, Klebsiella

  4. Fyziológia a štruktúra • G- paličky, obvykle pohyblivé (bičíky)- okrem Klebsielly, netvoria spóry, fakultatívne anaeróbne, nenáročné nutričné požiadavky, biochemicky aktívne, kataláza +, oxidáza -, cytochromoxidáza COX - = dif.dg.od ostatných G - paličiek • Skvasovanie laktózy + alebo – (patogénne Salmonella, Shigella, Yersinia, a Proteus neskvasujú) rezistencia na žlčové soli (Salmonella), prítomnosť púzdra (Klebsiella) - dif.dg v rámci Enterobacteriaceaei • 3 skupiny antigénov: • - somatický O antigén - najdôležitejší antigén bb. steny, termostabilný, LPS, zložený z 3 súčastí - O polysachrid, kórový polysacharid a lipid A - s endotoxínovou aktivitou • - púzdrový K antigén - termolabilný, skrížene reagujúci s protilátkami proti iným baktériám. U Salmonella typhi sa nazýva Vi antigén. • - bičíkový H antigén - termolabilný, podlieha antigénnym zmenám

  5. Laboratórna diagnostika • rastú dobre na neselektívnych médiách • Selektívne média na odlíšenie patogénnych - laktóza negatívnych kmeňov Salmonella, Shigella • Biochemická identifikácia – Hajnov test, Enterotesty – súbor biochemických testov • Sérodiagnostika – odlíšenie antigénnej štrukktúry – Salmonelly, Shigelly, E.coli • Interpretácia výsledkov – vo vzorke zo stolice – Salmonella, Shigella, Yersinia – patogénne, ostatné enterobacteriaceae – podľa stavu eubiózy, pri premnožení - z materiálov za fyziologických podmienok sterilných : moč – IMC, ascendentná infekcia, krv – najčastejšie etiol. agens, rana, spútum – v dostatnočnom množstve, TT,TS - monokultúra

  6. Surface of tube medium – aerobe environment, lactose negative bacteria do not ferment, it is alkaline, red Lower part - in anaerobe environment, enterobacteria ferments glycids – acidic – yellow or black H2S . , nonfermenters do not ferment = red – Ps. aeruginosa 1 negative control 2 Ps.aeruginosa : not fermenting - red 3 Shigella sonnei: H2S - negat.,gas – negat., TSI – alcaline/acidic red/yellow lact.negat 4 Salmonella typhi: H2S – pozit., gas–negat., TSI – alcaline/alcaline red/yellow- black 5 Escherichia coli: H2S – negat.,gas -posit., TSI – acid/acidic yellow/yellow 6 Proteus mirabilis: H2S – posit, gas - negat., TSI – acidic /acidice yellow/yellow-black

  7. E. coli • Prítomná v GIT • vyvoláva - endogénne infekcie po zlyhaní imunitných bariér, z fyziologickej flóry- bakteriálnu sepsu ( z fokusu v močových cestách alebo GIT najčastejší G- vyvolávateľ sepsí), IMC ( väčšina ambulantných infekov, z GIT, špecifické sérotypy viažúce sa na epitel), - gastroenteritídy – EPEC, EIEC, ETEC - neonatálnu meningitídu - hemolyticko uremický sy – EHEC – O:157, H:7 • Vytvára komplex početných O-somatických, H- bičíkových a K - púzdrových antigénov.

  8. Klebsiella • Opúzdrená – mukózny vzhľad kolónií, zvýšená virulencia, nepohyblivá • Klebsiella pneumoniae – pneumónia u pacientov, ktorí nie sú schopný vykašľávaním vyčistiť aspiráty z ústnej dutiny. Nekkrotické deštrukcie alveolárnych priestorov. Sangvinolentné sútum. Infekcie rán, mäkkých tkanív a močového traktu • K. rhinoscleromatis - skleróm • K. ozaenae – atrofické ochorenie nosovej sliznice

  9. Proteus • Pohyblivá G- baktéria, Raussov fenomén • P. mirabilis – infekcie močového traktu, produkujú ureázu ( rozklad urey – močoviny, zmena pH, alkalinizácia, podpora tvorby kamienkov a toxicita pre epitel • Proteus vulgaris,

  10. Mikroskopia • E. coli – podľa Grama – G- palička • Klebsiella pneumoniae – podľa Burriho – dôkaz púzdra

  11. Burriho metóda na dôkaz púzdier • Na podložnom sklíčku sa urobí suspenzia vyšetrovanej kolónie a destilovanej vody • K suspenzii sa pridá kvapka tušu a urobí sa tenký náter • Preparát sa nechá uschnúť a fixuje sa teplom • Potom sa dofarbí kryštálovou violeťou, veľmi opatrne opláchne vodou, nechá okvapkať a prezerá pod imerziou

  12. Púzdra • Extracelulárne štruktúry obaľujúce baktérie, pevne priliehajúce k bb. • Polysacharidové ( len B. antracis – polypeptidové) • Nástroj patogenity – antifagocytárne vlastnosti, bráni vstupu antibiotík, má funkciu adhezínov • Niektoré baktérie sú vo forme opúzdrených aj neopúzdrených kmeňov (hemofilus influenzae)– opúzdrené sú virulentnejšie • Púzdro sa môže v starých kolóniách strácať, alebo ho neopúzdrené kmene môžu získať transdukciou z opúzdrených

  13. Kultivácia • E. coli na Krvnom agare –šedavé kolónie bez hemolýzy • E. coli na Endovej pôde – vypuklé kolónie s kovovým rastom • K. pneumoniae na KA – lesklé mukózne ťahavé kolónie • K. pneumoniae na Endovej pôde – ružové kolónie bez lesku • Proteus mirabilis – plazivý rast, Raussov fenomén – koncentriký rast od jedinej kolónie

  14. Sklíčková aglutinácia • Na podložnom sklíčku – suspenzia s FR • 1) Suspenzia + kvapka polyvalentných sér • s + poly ABC = aggl+ S+ poly DEF = aggl– • 2) Suspenzia + kvapka monovalentných sér • s + mono A = aggl.+ s + mono B = aggl – s + mono C = aggl.– • Výsledok – testovaný kmeň je typ A

  15. Biochemické vlastnosti - Enterotest • E.coli – + + + – – + – – – – – + + + + • K.pneumoniae – + – – + – + + + + + + + + + + • P.vulgaris + – + – + + + – – – – – + – + – • H2S LYS IND ORN URE PHE ESL SCI + čierna modrá červená modrá červená zelená čierna modrá • – bezf. Zelená žltá zelená žltá žltá bezf. žltá • MAL INO ADO CEL SUC SOR TRE MAN + modrá žltá žltá žltá žltá žltá žltá žltá • – žltá zelená zelená zelená zelená zelená zelená zelená

  16. Testy na skúmanie biochemických a metabolických aktivít baktérie Mikrometodiky, Automatizácia, Číselné kódy – MikroLaTesty, API, BBL Crystal Súbor biochemických testov usporiadaných za sebou tak, aby umožňovali číselnú identifikáciu podľa pravdepodobnosti. Pri pozitívnom teste sa mu pridelí číslo podľa lokalizácie v triplete. Sčítaním jednotlivých hodnôt sa dosiahne štvorciferná kombinácia, ktorá zodpovedá identifikovanému mikroorganizmu uvedenému v zozname. - - - 0 - + + 6 + - - 1 + + + 7 - + - 2 - - + 4 + - + 5 + + -3

  17. MikroLaTest Identifikácia Klebsiella pneumoniae – Enterotest + /- + - - +- + + + + + + + + + + /+

More Related