Evaluación del sistema inmune en el laboratorio.

1. Evaluación del sistema inmune en el laboratorio. INMUNOLOGIA Y VIROLOGIA VETERINARIA

2. OBTENCION DE UN RESULTADO

3. EVALUACION DEL SISTEMA INMUNOLOGICO • IN VIVO • PRUEBAS DE HIPERSENSIBILIDAD INMEDIATA • PRUEBAS DE HIPERSENSIBILIDAD RETARDADA • PRUEBAS DE SUERO AUTOLOGO • IN VITRO • ENSAYOS DE LABORATORIO.

4. EVALUACION DEL SISTEMA INMUNOLOGICO • INTEGRIDAD • DEFICIENCIAS • HIPERSENSIBILIDAD • NIVEL DE ACTIVIDAD • INMUNIDAD HUMORAL • MOLECULAS CIRCULANTES • INMUNIDAD CELULAR • FENOTIPAJE • CUANTIFICACION • FUNCIONALIDAD

5. INMUNIDAD HUMORAL • PROTEINAS. • ANTICUERPOS. • INMUNOGLOBULINAS. • CITOQUINAS/QUIMIOQUINAS. • MOLECULAS DE ADHESION. • RECEPTORES SOLUBLES. • PROTEINAS DEL COMPLEMENTO.

6. INMUNIDAD HUMORAL ENSAYOS • ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. • INMUNOELECTROFORESIS. • INMUNODIFUSION RADIAL. • NEFELOMETRIA. • RADIOINMUNOANALISIS. • ELISA. • INMUNOBLOT. • RAST. • AGLUTINACION. • IMUNOFLUORESCENCIA.

7. ELISA (ENZIME LINKED INMUNMUNOSORBANT ASSAY) • METODO CUANTITATIVO. • DETECTA ANTICUERPOS, SUBCLASES DE INMUNOGLOBU. AUTOANTICUERPOS.

8. INMUNOBLOT • METODO CUALITATIVO. • IDENTIFICACION ANTICUERPOS ESPECIFICOS. • FACIL REALIZACION. • REGISTRO PERMANENTE.

9. INMUNOFLUORESCENCIA

10. FENOTIPAJE • CELULAS EN CIRCULACION • CELULAS EN TEJIDOS • CUANTIFICACION • DIFERENTES ELEMENTOS CELULARES • FUNCIONALIDAD • LINFOCITOS B – LINFOCITOS T – CELULAS NK – FAGOCITOS.

11. METODOS DE ANALISIS • CITOMETRIA DE FLUJO. • INMUNOHISTOQUIMICA. • INMUNOFLUORESCENCIA. • CULTIVO CELULAR. • QUIMIOTAXIS. • QUIMIOLUMINISCENCIA.

12. TOLERANCIA INMUNOLOGICA

13. TOLERANCIA INMUNOLOGICA • La ausencia específica de respuesta del sistema inmunitario frente a un antígeno, ya sea propio o extraño, inducida por el contacto previo con dicho antígeno. Se trata de un estado activo, dotado de especificidad y de memoria. • Esta tolerancia tiene una importancia capital en el proceso de trasplante de órganos. • Autotolerancia (enf. Inmunologicas) • Tolerancia inducida

14. INMUNOGENO • Cualquier sustancia extraña que puede desencadenar una respuesta inmunitaria adaptativa en el huésped. • Sustancia que induce la respuesta inmune adaptativa. Todos los inmunógenos son antígenos, pero no todos los antígenos son inmunógenos. • Exposición secundaria la inmunógeno conduce a respuestas mas enérgicas y rápidas (memoria).

15. HAPTENO • Compuesto incapaz, por si mismo, de inducir una respuesta inmune pero que reacciona con los componentes de la respuesta que se induce cuando se conjuga con una molécula portadora. • sustancias de bajo peso molecular, que no son capaces, por si mismos, de inducir una respuesta inmune pero que cuando se unen a moléculas de peso molecular alto (tales como las proteínas - Carrier) forman conjugados capaces de inducir una respuesta inmune.

16. TOLEROGENO • Antígeno que invoca una no-respuesta inmune específica debido a su forma molecular. Si su forma molecular es cambiada, un tolerógeno puede convertirse en inmunógeno. • Sustancia que normalmente es inmunógena pero que en determinadas circunstancias produce inmunotolerancia. • Exposiciones repetidas al tolerógeno conduce a respuestas cada vez menores.

17. ENFERMEDAD POR FALLO DE LA INMUNIDAD • El exceso de respuesta frente antígenos innocuos, propios o ajenos y el exceso o falta de respuesta a los patógenos produce múltiples enfermedades. El reconocimiento del mecanismo implicado en cada caso puede ayudar prevenir o curar.

18. TOLERANCIA INMUNOLOGICA • Es la ausencia especifica de respuesta inmune frente a un antígeno ya sea propio o extraño. • Una característica fundamental del sistema inmune es la de no reaccionar frente a los componentes propios del individuo, aun cuando posee la cualidad de responder frente a cualquier extraño al mismo. • Esta capacidad de reconocimiento y aceptación de los componentes propios del organismo se debe al fenómeno de Tolerancia Inmunológica.

19. TOLERANCIA INMUNOLOGICA • Cuando el sistema inmune actúa por defecto o por exceso, la tolerancia se ve afectada, apareciendo diferentes tipos de enfermedades, como la autoinmunidad, inmunodeficiencias e hipersensibilidad. • Características de la Tolerancia • Fenómeno de naturaleza inmunológica. • Especifica frente a cada antígeno. • Adquirida y es inducida mas fácilmente en linfocitos inmaduros.

20. TOLERANCIA INMUNOLOGICA • Los principales mecanismos de adquisición y mantenimiento de la tolerancia son delección, anergia e ignorancia clonal. • Cada uno de ellos puede intervenir a nivel central génesis celular (timo o medula ósea para las células T y B) o periféricos (órganos linfáticos secundarios y otros tejidos) sobre células adultas.

21. TOLERANCIA CENTRAL • El mecanismo predominante en la adquisición de tolerancia a nivel central es la delección clonal. • Una gran proporción de timocitos que mueren en el timo sin pasar a la periferia. • La aparición de enfermedades autoinmunes en animales timectomizados. • La demostración de muerte intratimica de aquellos timocitos que reconocen determinados antígenos auto antígenos. • La implantación temprana en el timo de células que expresan aloantígenos (antígenos propios de un individuo pero distintos de la misma especie) determina la tolerancia a distintos aloantígenos.

22. TOLERANCIA PERIFERICA • Los clonos auto reactivos de linfocitos T no responden a los antígenos periféricos. • Los mecanismos que subyacen a esta respuesta no especifica son muy variados y entre ellos se incluyen ignorancia clonal, anergia, delección, inhibición y supresión. • La ignorancia clonal es el mecanismo por el cual los linfocitos T no detectan la presencia de células propias de manera adecuada.

23. TOLERANCIA PERIFERICA • Se ha demostrado que algunas células T circulantes auto reactivas no proliferan en respuesta a la presencia del auto antígeno en el contexto apropiado. Se ha considerado que dichas células están en una condición de no respuesta denominada Anergia. • En el momento de la estimulación se ponen en marcha una serie de mecanismos reguladores que terminan por inhibir la proliferación del clon correspondiente. Dentro de estos mecanismos inhibidores implica la molécula CTLA4.

24. TOLERANCIA PERIFERICA • Existe un repertorio de células T supresoras inhibiendo contantemente a las células T helperauto reactivas. La dificultad para clonar las células T con actividad supresora y la falta de caracterización a nivel molecular del fenómeno de supresión , mantiene un interrogante sobre este aspecto de la regulación de la respuesta inmune.

25. TOLERANCIA LINFOCITOS B • Los linfocitos B auto reactivos no se activan por si solos ya que para la mayor parte de las respuestas , los linfocitos B requieren de señales (citocinas y contacto directo) de las células T cooperadoras, cuyo repertorio es mucho menos auto reactivo y esta mucho mas regulado. • La alta frecuencia de linfocitos B auto reactivos se explica porque estos no sufre un proceso de selección tan riguroso como el de los linfocitos T en el timo.

26. TOLERANCIA LINFOCITOS B • Además de la diversidad de los receptores (Igs) de los linfocitos B incluyen un mecanismo de hipermutacion somática, que actúa en el curso de la respuesta inmune y que expandiendo de nuevo el repertorio puede generar auto anticuerpos de alta afinidad. • Por esta tendencia de las celulas B a la auto reactividad , por lo que no son necesarios mecanismos de delección clonal y de anergia clonal de células B para asegurar un grado de tolerancia B.

27. REACCIONES DE HIPERSENSIBILIDAD

28. REACCIONES DE HIPERSENSIBILIDAD • Se refiere a una excesiva o inadecuada respuesta inmunitaria frente a antígenos ambientales, habitualmente no patógenos, que causan inflamación tisular y malfuncionamiento orgánico. • Las reacciones de RHS requieren de un estado de pre sensibilización inmune en el huésped. • De acuerdo a los mecanismos involucrados y al tiempo en la respuesta la RHS en I, II, III, IV. • Una presentación clínica puede involucrar mas de un tipo de RHS.

29. REACCION DE HIPERSENSIBILIDAD TIPO I • Reacción alérgica provocada por re-exposición a un tipo específico de antígeno (alérgeno). • La exposición puede haber sido poringestión, inyección o por contacto directo. • En la primera exposición al alérgeno los linfocitos T inducen la activación de linfocitos B secretores de IgE , la cual armará al mastocito. En una segunda exposición el mastocito activado secretará las sustancias vaso activas produciéndose la reacción alérgica.

30. REACCION DE HIPERSENSIBILIDAD TIPO I • Los mediadoresactivos son la histamina, leucotrieno y prostaglandinas. Los principales efectos de estos productos son la vasodilatación y la contracción del musculo liso. • Este tipo de reacción puede ser localizada o sistémica. • Los síntomas varían de una irritación leve a la muerte súbita por anafilaxia. • El tratamiento generalmente involucra el uso de epinefrina, antihistamínicos y cortico esteroides.

31. REACCION DE HIPERSENSIBILIDAD TIPO II • Los anticuerpos producidos por el sistema inmune se unen a antígenos en la superficie misma de las células del paciente. • Estas células son reconocidas por macrófagos o células dendríticas que actúan como células presentadoras de antígeno, lo que causa que los linfocitos B respondan produciendo anticuerpos en contra del antígeno. • Los anticuerpos de tipo IgG e IgM se unen a éstos antígenos formando complejos que activan la vía clásica del complemento iniciando una secuencia que terminará con la eliminación de las células que presentan los antígenos extraños, causando lisis y muerte celular.

32. REACCION DE HIPERSENSIBILIDAD TIPO III • Se forman en la sangre complejos inmunes solubles, es decir, agregados de anticuerpos IgG e IgM, que son depositados en varios tejidos (típicamente la piel, riñóny las articulaciones) donde disparan una respuesta inmunitaria fundamentado en la vía clásica de la activación del complemento. • Algunos ejemplos • Glomerulonefritispor complejos inmunes • Artritis reumatoide • Enfermedad del suero • Endocarditis bacteriana subaguda

33. REACCION DE HIPERSENSIBILIDAD TIPO IV • Reaccion tardía, pues a la reacción le toma 2 o 3 días para instalarse. A diferencia de los otros tipos, no es mediada por anticuerpos, sino por células inmunitarias. • Los linfocitos T CD8 y CD4 ayudadores reconocen los antígenos en un complejo con el complejo mayor de histocompatibilidad tipo I y II. • Las células presentadoras de antígeno en este caso son los macrófagos que secretan IL-12, el cual estimula la proliferación de más linfocitos T. Los CD4+ secretan también IL-2 e interferón gamma, estimulando aún más la liberación de citocinas, de ese modo mediando la respuesta inmunitaria.

34. REACCION DE HIPERSENSIBILIDAD TIPO IV • Las células CD8 destruyen las células diana al entrar en contacto con ellas mientras que los macrófagos activados producen enzimas hidrolíticas y, ante ciertos patógenos intracelulares, se transforman en células gigantes multinucleadas. • Arteritis temporal • Algunos síntomas de la lepra • Algunos síntomas de tuberculosis • Rechazo de trasplantes