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BRUCELLA

BRUCELLA. Clase: Proteobacteria Subclase: Alfa Orden: Rizobiales Familia: Brucellaceae Género: Brucella. TAXONOMIA. GENERO BRUCELLA. HUÉSPEDES HABITUALES. ESPECIE. abortus (8 biovars) suis (5 biovars) melitensis (3 biovars) canis (1 biovar) ovis (1 biovar)

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Presentation Transcript

  1. BRUCELLA

  2. Clase: Proteobacteria Subclase: Alfa Orden: Rizobiales Familia: Brucellaceae Género: Brucella TAXONOMIA

  3. GENERO BRUCELLA HUÉSPEDES HABITUALES ESPECIE abortus (8 biovars) suis (5 biovars) melitensis (3 biovars) canis (1 biovar) ovis (1 biovar) neotomae (1 biovar) maris (2 biovars) BOVINO PORCINO CAPRINO OVINO CANINO OVINO ROEDORES MAMÍFEROS MARINOS

  4. AISLAMIENTO DE LAS ESPECIES DE Brucella 1886 - Bruce - Br. melitensis del hombre 1897 - Bang - Br. abortus de bovinos 1914 - Traum - Br. suis de porcinos 1953 - Buddle y Boyes - Br. ovis de ovinos 1957 - Stoenner y Lackman - Br. neotomae de ratas 1966 - Carmichael - Br. canis de caninos 1994 – Ross et al – Br. cetaceae de delfines, bufeos 1994 – Ross et al – Br. pinnipediae de focas

  5. CARÁCTERÍSTICAS DEL MICROORGANISMO COCOBACILO AEROBIO, GRAM NEGATIVO, INTRACELULAR FACULTATIVO. INMOVIL, NO ESPORULADO, NO CAPSULADO. SE TIÑE DE COLOR ROSADO CON LA TINCIÓN MODIFICADA DE ZIEHL-NIELSEN. NECESIDAD DE CO2

  6. RELACIÓN CON LA CÉLULA HOSPEDADORA Membrana celular Intracelulares facultativos Intracelulares obligados Célula hospedadora Extracelulares

  7. TIPOS CARACTERÍSTICOS DE ENVOLTURA • GRAM + • GLUCOPÉPTIDO • PROTEÍNAS • ÁCIDO LIPOTEICOICO • ÁCIDOS • TEICURÓNICOS • POLISACÁRIDOS • AAR • GLUCOPÉPTIDO • POLIPÉPTIDOS • GLUCOLÍPIDOS • ÁCIDO MICÓLICO • ARABINOGALACTANOS • CERA DE • SULFOLÍPIDOS • MICÓSIDOS • GRAM - • GLUCOPÉPTIDO • LIPOPROTEÍNAS • MEMBRANA EXTERNA • LIPOPOLISACÁRIDOS • PROTEÍNAS • FOSFOLÍPIDOS • POLISACÁRIDOS

  8. ESTRUCTURA ANTIGÉNICA B. abortus B. suis B. melitensis A M

  9. FAGOSOMA Gránulo secundario 5´GMP NADPH oxidasa NADPH NADP+ Gránulo primario Lisozima Proteasas Defensinas O-2 H+ SOD H2O2 catalasa Cl- Cl- MPO Lisozima Lactoferrina HOCl DEGRADACIÓN

  10. Proteínas portadoras Bacteria Sideróforo Célula Lactoferrina Fe3+ Fe3+ Transferrina Fe3+ Fe3+ Receptor Fe2+ Hemoglobina Fe2+

  11. POSIBLES MECANISMOS DE SUPERVIVENCIA • PERMANECE EN EL FAGOSOMA INTACTO Y BLOQUEA LA FUSIÓN POSTERIOR CON EL LISOSOMA • DEBE RESISTIR POTENTES INTERMEDIARIOS DEL O2 (H2O2 Y RADICALES OXHIDRILOS) • INHIBE EL ESTALLIDO RESPIRATORIO O LO PROVOCA MUY DÉBILMENTE Y DE CORTA DURACIÓN) • SE PUEDE REFUGIAR FUERA DEL ALCANCE DEL LISOSOMA. SE DESCRIBIÓ SU PRESENCIA EN EL RER DE DIFERENTES CÉLULAS, AUNQUE NO EN MACRÓFAGOS • PRODUCCIÓN DE GUANOSINA 5´MONOFOSFATO (GMP) Y ADENINA QUE INHIBEN FUSION FAGO-LISOSOMA, DEGRANULACIÓN, ACTIVACIÓN SISTEMA MIELOPEROXIDASA-HALURO Y LA PRODUCCIÓN DE TNF

  12. Estrategias para evadir el sistema inmune

  13. SELECCIÓN DE MUESTRAS • SUERO, CALOSTRO, LECHE • FLUJO VAGINAL, PLACENTA Y COTILEDONES • SEMEN • LIQ. ABCESOS, HIGROMAS, BURSITIS ANIMALES VIVOS PRODUCTOS DE ABORTO • CONTENIDO CUAJAR • PULMÓN, BAZO • MEMBRANAS FETALES

  14. DISTRIBUCIÓN DE B abortus EN EL ANIMAL INFECTADO

  15. DIAGNÓSTICO • HISTOPATOLÓGICO • SEROLÓGICO • BACTERIOLÓGICO

  16. DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO • Método de Köster • Método de Ziehl-Neelsen modificado • Inmunofluorescencia TÉCNICAS BACTERIOSCÓPICAS • Medios sólidos • Medios líquidos • Medio difásico PROCEDIMIENTOS DE CULTIVO • Cobayos • Lauchas • Hámsters INOCULACION EXPERIMENTAL

  17. Diferenciación de especies • Ureasa • requerimiento de CO2 • producción de SH2 • desarrollo en presencia de tionina • desarrollo en presencia de fucsina • aglutinación con sueros monoespecíficos • tipificación por bacteriófagos

  18. MEDIO DE CASTAÑEDA Usado de humanos para hemocultivo

  19. INHIBICIÓN POR TIONINA

  20. INHIBICIÓN POR FUCSINA

  21. RESISTENCIA LISIS POR FAGO

  22. COLORACIÓN DE STAMP COLORACIÓN DE STAMP COLORACIÓN DE STAMP

  23. PRUEBAS PARA MEDIR E IDENTIFICAR LA RESPUESTA INMUNE • TEST DE ELISA • INMUNOFLUORESCENCIA • RADIOINMUNOENSAYO PRIMARIAS • AGLUTINACIÓN • PRECIPITACIÓN • FIJ COMPLEMENTO SECUNDARIAS • NEUTRALIZACIÓN • PROTECCIÓN TERCIARIAS PRUEBAS BÁSICAS MOLECULARES • PCR • HIBRIDACIÓN

  24. TÉCNICAS UTILIZADAS • PRUEBA TAMIZ: BPA • PRUEBAS COMPLEMENTARIAS: 2 MERCAPTOETANOL - RIVANOL • PRUEBA DEFINITORIA: FIJ COMPLEMENTO • PRUEBA DE VIGILANCIA EPIDEMIOLÓGICA: PRUEBA ANILLO EN LECHE (PAL) • OTRAS: ELISA-I, ELISA-C

  25. SEROLOGÍA

  26. PRUEBA DE BPA (ANTÍGENO BUFFERADO)

  27. PRUEBA LENTA EN TUBO – 2 MERCAPTOETANOL

  28. FIJACIÓN DE COMPLEMENTO

  29. PRUEBA DEL ANILLO EN LECHE (PAL)

  30. INMUNODIFUSIÓN EN GEL DE AGAR (AGID)

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