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UNIVERSIDAD CENTROOCCIDENTAL “LISANDRO ALVARADO” DECANATO DE CIENCIAS DE LA SALUD DEPARTAMENTO DE MEDICINA PREVENTIVA Y SOCIAL SECCION DE MICROBIOLOGÍA. COCOS GRAM POSITIVOS. Microbiología Médica I Tema # 10 Lic. Yudy Aranguren Enero 2009. BLOQUE 2: TEMA 10: CONTENIDO:
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UNIVERSIDAD CENTROOCCIDENTAL “LISANDRO ALVARADO” DECANATO DE CIENCIAS DE LA SALUD DEPARTAMENTO DE MEDICINA PREVENTIVA Y SOCIAL SECCION DE MICROBIOLOGÍA COCOS GRAM POSITIVOS Microbiología Médica I Tema # 10 Lic. Yudy Aranguren Enero 2009
BLOQUE 2: • TEMA 10: CONTENIDO: • Cocos Gram positivos patógenos • Morfotipos • Géneros • Características biológicas • Diferenciación bioquímica OBJETIVOS: 10.1.- Diferenciar los diferentes morfotipos de cocos según el exámen directo al Gram 10.2.- Diferenciar los géneros Staphylococcus, Streptococcus y Enterococcus según sus características morfológicas, tintoriales y bioquímicas. 10.3.- Describir los pasos para identificación de los diferentes géneros de cocos Gram positivos
GÉNERO ENTEROCOCCUS 1984 Estudios ADN No Enterococcus: Streptococcus bovis COCOS GRAM POSITIVOS GÉNEROS DE IMPORTANCIA CLÍNICA GÉNERO STAPHYLOCOCCUS GÉNERO STREPTOCOCCUS Clasificación de Lancefield: Grupo A Grupo B Grupo C Grupo D No tipificables
GÉNERO: Staphylococcus Tinción de Gram • Inmóviles GENERALIDADES: • Cocos Gram positivo • Tienen forma redondeada y se presentan en pares o en grupos en forma de racimos de uva • No forman esporas • Aerobios y anaerobios facultativos • Crecen a una temperatura óptima entre 30-37ºC.
Son catalasa positivo: Agar Salado Manitol 7% • Resistente a concentraciones de sal (7%) - + • Muy activos metabolicamente: Fermentan azúcares • Fáciles de cultivar • Algunos producen pigmentos
Staphylococcus aureus. Staphylococcus epidermidis Staphylococcus saprophyticus ESPECIES DE IMPORTANCIA CLINICA Flora normal, pero potencialmente patógenos en casos de paciente inmunocomprometidos
Beta Hemolítico • CARACTERISTICAS : • Produce pigmentos (algunas cepas) • Manitol positivo • Coagulasa positivo Staphylococcus aureus
Proteína A Cápsula: Inhibe la fagocitosis IgG Peptidoglicano Ac. Teicóico: Adherencia inespecífica Pared celular FACTORES DE PATOGENICIDAD: ESTRUCTURA CELULAR Adhesinas: Proteínas de superficie que favorece al anclaje a la célula huésped.
FACTORES DE PATOGENICIDAD: FACTORES SOLUBLES ENZIMAS (Invasinas): Hialuronidasa Lipasas Nucleasa Coagulasa Estafiloquinasa TOXINAS: Leucocidina Hemolisinas Toxina del sindrome del shock tóxico (TSST-1) Exfoliativa: sindrome de la “piel escaldada”
PRODUCTOS CELULARES: ENZIMAS (Invasinas): Hialuronidasa Lipasas Proteasas Difusión de la bacteria en los tejidos. Nucleasa Coagulasa: Transforma el fibrinógeno en fibrina formando una capa protectora
Exfoliativa: Toxina del sindrome de la “piel escaldada” EXOTOXINAS: • Leucocidina: Toxina que produce lisis de polimorfonucleares y de macrófagos • Hemolisinas: Cuatro tipos de toxinas (alfa, beta, gamma y delta) lisan gróbulos rojos, leucocitos y la alfa es también dermonecrótica. • Toxina del Sindrome del Shock Tóxico (TSST-1): provoca los síntomas del SST. • ENTEROTOXINAS • Enterotoxinas: Hay 7 tipos diferentes que producen intoxicación alimentaria
FACTORES DE PATOGENICIDAD: • Presenta un glicocalix de protección • Adherencia a superficies plásticas y metálicas Staphylococcus epidermidis • CARACTERISTICAS : • Coagulasa negativo • No hemolíticos • Crece a 7% NaCl • No fermenta Manitol • Sensible a la Novobiocina
FACTORES DE PATOGENICIDAD: • Receptores oligosacáridos específicos de células de la uretra Staphylococcus saprophyticus • CARACTERISTICAS : • No contiene proteína A • Coagulasa negativo • No hemolítico • Crece a 7% NaCl • No fermenta Manitol • Resistente a la Novobiocina
POSITIVAS NEGATIVAS GÉNERO Staphylococcus GÉNERO Streptococcus Diagnóstico de laboratorio ? ? COCOS GRAM POSITIVOS CATALASA REDUCCIÓN DE NITRATOS
SENSIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA • S. aureus • S. epidermidis • S.saprophyticus COAGULASA ? POSITIVA NEGATIVA ? Staphylococcus aureus S. epidermidis S. saprophyticus - + PRUEBAS BIOQUÍMICA PARA COCOS GRAM POSITIVOS: COCOS GRAM POSITIVOS CATALASA REDUCCIÓN DE NITRATOS POSITIVAS
SENSIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA SENSIBLE-SIN CRECIMIENTO RESISTENTE-CON CRECIMIENTO S. epidermidis S. saprophyticus
GÉNERO STREPTOCOCCUS y GÉNERO ENTEROCOCCUS MORFOTIPOS
Catalasa negativo GÉNERO STREPTOCOCCUS y GÉNERO ENTEROCOCCUS • CARACTERISTICAS DEL GÉNERO • Cocos Gram positivos dispuestos en cadenas • o en pares • No poseen cápsula : Excepto los Streptococcus pneumoniae • No son esporulados
ALFA BETA GAMMA • Fermentan azucares sin producir gas - + GÉNERO STREPTOCOCCUS y GÉNERO ENTEROCOCCUS • Producen diferentes patrones de hemólisis: • Aerobios facultativos • Muy exigentes en cuanto a requerimientos nutritivos
Enterococcus sp ( algunas cepas) Enterococcus sp ( algunas cepas) Streptococcus pneumoniae Streptococcusviridans Streptococcus agalactiae Grupo D no Enterococcus (Streptococcus bovis) Enterococcus sp. Streptococcus pyogenes GÉNERO STREPTOCOCCUS y GÉNERO ENTEROCOCCUS CLASIFICACIÓN SEGÚN EL TIPO DE HEMÓLISIS
Enterococcus sp. GRUPO D (ac. Teicóico) GRUPO C y G GÉNERO STREPTOCOCCUS y GÉNERO ENTEROCOCCUS • CLASIFICACIÓN SEGÚN EL CARBOHIDRATO DE PARED CELULAR • Clasificación de Rebeca Lancefield (1933) • Sólo para los beta hemolíticos segúnel carbohidrato de pared especifico de grupo Streptococcus agalactiae Streptococcus pyogenes GRUPO B GRUPO A
GÉNERO STREPTOCOCCUS y GÉNERO ENTEROCOCCUS • CLASIFICACION SEGÚN SUS DIFERENCIAS FISIOLÓGICAS Y BIOQUÍMICAS: • Se establecen diferencias entre las 65 especies que componen este género. • Se utilizan galerías de identificación específicas, como la galería API Strep • Posee más de 20 pruebas bioquímicas API 20 Strep
Grupo A: Streptococcus pyogenes ENFERMEDADES
Poseen cápsula FACTOR DE VIRULENCIA Alfa hemolíticos Streptococcus pneumoniae • Diplococos Gram positivos • Sensibles a la Optoquina • Factores de patogenicidad: • 1.- Cápsula • 2.- Enzimas: neuraminidasa: factor de difusión • 3.- Toxinas: • Hemolisina dermatotóxica (neumolisina) • Leucocidina
- + S. aureus S. agalactiae S.pyogenes GRUPO B: Streptococcus agalactiae • CARACTERÍSTICAS: • Son beta hemolíticos Streptococcus agalactiae • Hidrolisan el hipurato • Prueba de CAMP: El estreptococo del grupo B produce un factor que aumenta la beta hemólisis de una cepa indicadora de S. aureus. Factores de patogenicidad: Producen enzimas: neuraminidasa, proteasa, hialuronidasa, y hemolisina
Género Enterococcus = Antes Streptococcus del GRUPO D • CARACTERÍSTICAS: • Morfotipo: Diplococos • Aerobios facultativos • Hemólisis Gamma (No hemoliticos) • Poco exigentes para cultivar • Crecen a 6,5% de NaCl • 12 Especies: Más comunes: Flora normal intestinal • Enterococcus faecalis 85-90% • Enterococcus faecium 5-10% • Enfermedades nosocomiales: Resistencia natural a cefalosporinas y otros antibióticos
- + - - + + Género Enterococcus = Antes Streptococcus del GRUPO D FACTORES DE PATOGENICIDAD: citolisinas, hialuronidasas, beta lactamasa CLASIFICACIÓN POR PRUEBAS BIOQUÍMICAS: 1.- Hidrólisis de bilis-esculina: Todos lo Streptococcus del Grupo D son Bilis-esculina POSITIVO • 2- Crecimiento en solución salina al 6,5% • Enterococcus (Enterococcus faecalis , Enterococcus faecium): • CRECEN • No Enterococcus(Streptococcus bovis): NO CRECEN
Streptococcus mutans Streptococcus mitis Streptococcus salivarium Streptococcus sanguis GRUPO VIRIDANS • CARACTERISTICAS: • Habitan la boca principalmente: Flora normal • Responsables de las caries • Hemólisis Alfa • No son tipificables con las pruebas anteriores
COCOS GRAM POSITIVOS (Grupos) (Cadenas y pares) Hemolisis Coagulasa
? EN RACIMOS ? EN CADENAS DIAGNOSTICO DE LABORATORIO DE COCOS GRAM POSITIVOS • MUESTRA: Extendido y frotis para Tinción de Gram • Exudado faringeo • Pus • Sangre • LCR 1.- EXAMEN DIRECTO: Tinción de Gram Gram: cocos Gram positivos
S. aureus • S. epidermidis • S. saprophyticus ? S. epidermidis S. saprophyticus ? SENSIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA POSITIVA NEGATIVA Staphylococcus aureus 2.- PRUEBAS BIOQUÍMICA PARA COCOS GRAM POSITIVOS: COCOS GRAM POSITIVOS CATALASA REDUCCIÓN DE NITRATOS POSITIVAS NEGATIVAS Streptococcus COAGULASA SENSIBLE-SIN CRECIMIENTO RESISTENTE-CON CRECIMIENTO S. epidermidis S. saprophyticus
Streptococcus BETA ALFA GAMMA 3.- CULTIVO EN AGAR SANGRE: Agar sangre en 10% Co2: Enterococcus sp (Grupo-D) Crece en NaCl 6,5% S. pyogenes (Grupo-A) Sensible a Bacitracina S. pneumoniae Sensible a Optoquina Grupo-D No Enterococcus No crece en NaCl 6,5% Grupo Viridans Reacciones bioquímicas S. agalactiae (Grupo-B) Prueba Camp positiva Enterococcus sp (Grupo-D) Crece en NaCl 6,5% Enterococcus sp (Grupo-D) Crece en NaCl 6,5% Grupo Viridans Reacciones bioquímicas
AUTOEVALUACIÓN TIPO DE HEMÓLISIS NO HEMOLITICO
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