190 likes | 617 Views
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO. DIAGNÓSTICO INDIRECTO. NECESIDAD. Imposibilidad de diagnóstico directo Diagnóstico directo muy complicado y costoso Estudios epidemiológicos. RESPUESTA INMUNOLÓGICA Y DIAGNÓSTICO. Contacto con un antígeno por primera vez... Aparición precoz de Acs clase IgM
E N D
NECESIDAD • Imposibilidad de diagnóstico directo • Diagnóstico directo muy complicado y costoso • Estudios epidemiológicos • ...
RESPUESTA INMUNOLÓGICA Y DIAGNÓSTICO • Contacto con un antígeno por primera vez... • Aparición precoz de Acs clase IgM • Persistencia corta • En general: infección aguda • Aparición más tardía de Acs clase IgG • Persistencia prolongada • Seroconversión
SEROCONVERSIÓN • Incremento (generalmente 4 veces) en la concentración de anticuerpos específicos (IgG) al comparar dos muestras separadas en el tiempo, habitualmente 2 semanas Estímulo antigénico Infección
PRUEBAS SEROLÓGICAS.SELECCIÓN • Sensibilidad: probabilidad de que un individuo enfermo de positivo en el test (% de (+) en grupo de enfermos • Especificidad: probabilidad de que un individuo sano de negativo en el test (% de (-) detectados en grupos de sanos) • Valor predictivo positivo: proporción de verdaderos positivos entre aquellos que han sido identificados como (+) por el test • Valor predictivo negativo: proporción de verdaderos negativos entre aquellos que han sido identificados como (-) por el test
PRUEBAS SEROLÓGICASTIPOS • Técnicas rápidas y automatizadas • Técnicas cualitativas y cuantitativas • Título de un suero: Tras diluciones seriadas y crecientes de un suero, la última dilución que da un resultado positivo • Perfiles
PRUEBAS SEROLÓGICAS. TIPOS Ag unido a fase sólida + Suero Lavado + Anti-Ac* Lavado + Sustrato Enzimoinminoanálisis de absorción ELISA
REACCIÓN DE PRECIPITACIÓN Antígeno soluble Exceso de antígeno Anillo de precipitación Equvalencia Exceso de anticuerpo Anticuerpo
INMUNODIFUSIÓN Ac Ag Banda de precipitación Ag Ac Bandas de precipitación
Ag Agar gel Ag INMUNOELECTROFORESIS anticuerpo bandas de precipitación
HEMAGLUTINACIÓN pocillo anticuerpo células sanguíneas aglutinadas células sanguíneas no aglutinadas (botón rojo)
TEST DE COOMBS + + complejocélula-Ac anti Ig humana aglutinación anticuerpos anti Rh hematíes
Añadir hematíes-Ac. Añadir antígeno Añadir complemento TEST DE FIJACIÓN DEL COMPLEMENTO TEST NEGATIVO Suero sin anticuerpos No formación de complejos Complemento libre Células rojas lisadas
Añadir antígeno Añadir hematíes-Ac. Añadir complemento TEST DE FIJACIÓN DEL COMPLEMENTO TEST POSITIVO Suero con anticuerpos Formación de complejos Fijación del complemento Células rojas íntegras
INMUNOFLUORESCENCIA Colorante fluorescente Anticuerpo Anticuerpo anti Ac. original Colorante fluorescente Antígeno Superficiecelular Anticuerpo
RADIOINMUNOENSAYO Placa Antígeno Pocillo Anticuerpo Anticuerpo marcado
ELISA Placa Antígeno Pocillo Enzima Anticuerpo Substrato Producto coloreado