Aleš Janda Ústav imunologie ales.janda @lfmotol.cuni.cz imunologie.lf2.cuni.cz

1. Imunologické laboratorní vyšetření aneb co je na imunologické žádance Aleš Janda Ústav imunologie ales.janda@lfmotol.cuni.cz http://imunologie.lf2.cuni.cz

2. Ústav imunologie na webu http://imunologie.lf2.cuni.cz/laborator.php

3. Žádanky

4. Imunoglobuliny I primární, sekundární imunodeficience, autoimunita, malignita (diagnóza, dynamika) NRg/l, IU/ml

5. IgG • chronický zánět • autoimunita • malignita • imunodeficience (primární, sekundární) http://www.path.cam.ac.uk/~mrc7/igs/mikeimages.html

6. Sekundární hypogamaglobulinémie

7. IgG1-4 • IgG1>IgG2>IgG3>IgG4 • IgG1+3 (proteinové Ag) • IgG2+4 (polysacharidové Ag, opouzdřené bakt.) • IgG4 (větší extracelulární paraziti) • nejčastější deficit IgG1+4, často spojeno sIgA deficitem • klinické příznaky + > 2 roky věku • x selektivní protilátková deficience (SAD) • velmi drahé vyšetření http://www.path.cam.ac.uk/~mrc7/igs/mikeimages.html

8. IgM • akutní zánět • autoimunita • malignita • makroglobulinémie, hyper-IgM syndrom

9. IgA • sérové x sekretované (zk. bez činidla) • imunodeficience (sIgA deficit) • autoimunita • malignita • periodické horečky http://sprojects.mmi.mcgill.ca/immunology/Ig_text.htm

10. IgD • vázán na membrány • minimální sekrece (mg/l, <0.5 % Ig) • nejasná funkce • periodické horečky (hyper-IgD syndrom) • indikovat s rozvahou

11. IgE • nízká hladina (IU/ml, <0.01% Ig) • alergie • parazitární infekce • vaskulitida (sy Churga-Straussové) • Omenn syndrom (SCID, + eozinofilie) • hyper-IgE syndrom

12. Specifické IgE

13. Specifické protilátky IgM, IgG, IgA • odpověď na vakcinaci • imunodeficience • selektivní protilátková deficience (SAD) • serologie infekce (ústav mikrobiologie) • ASCA – detekce IBD • pozor na IVIG

14. Eozinofiní kationický protein (ECP) • patří mezi granulární silně bazické proteiny uvolňované aktivovanými eozinofily • primárně anti-parazitární role • existuje vysoká korelace mezi koncentrací ECP a klinickými astmatickými symptomy, částečně i s aktivitou atopické dermatitidy • ECP odráží sezónní změny aktivity atopického onemocnění, nezávisle na koncentraci IgE

15. Kryoglobuliny I vysoká FW, vaskulitida,Raynaud fenomén, poškození ledvin, artritida, malignita, chronická hepatitida C V vzorek musí být uchováván při 37 st. C, odběr v laboratoři M měření kryoprecipitátu (Kryokrit) + imunoelektroforéza NR vždy se jedná o patologii • typ I - monoklonální IgG, IgM - hematologické malignity • typ II - mono- i polyklonální - artritida, vaskulitida, glomerulonefritida • typ III - často IgM - chronické infekce, chronická hepatitida C

16. M komponenta Imalignita, vysoká FW, hypergamaglobulinémie NRvždy patologické (u mladých) Mimunoelektroforéza, imunofixace • benigní (10% pac > 70 let), malignita (IgG, IgA, IgE) - plazmocytom, mnohočetný myelom, IgM - Waldenströmova makroglobulinémie • chronický zánět • systémová autoimunita • MGUS – Monoclonal Gammapathy of Unknown Significance

17. Cirkulující Imuno-Komplexy (CIK, CIC) • komplex antigen-protilátka • precipitace polyetylenglykolem (PEG) • depozice imunokomplexů ve tkáních x měříme v séru • zároveň měřit hladinu C3, C4 (pokles svědčí o ukládání CIK do tkání) • nespecifické • vzestup - glomerulonefritidy, vaskulutidy, SLE, RA, primární biliární cirhóza, paraproteinémie, akutním infekt se zvýšením IgM) • pokles – agama (hypo) globulinémie, ukládání imunokomplexů do tkání

18. Komplement • imunodeficience, autoimunita, otoky, inf. Neisseria spp. • C3 (klasická i alternativní cesta) • C4 (klasická cesta) • zvýšení – proteiny akutní fáze • snížení – deficit, spotřeba • CH100 (hemolytická aktivita komplementu) • zřídka vyšetření alternativní cesty aktivace (AP100,50) • C1INH - hereditární angioedém (typ I, II) - kvantitativní, kvalitativní vyš.

19. Autoprotilátky

20. Vyšetření buněčné imunity

21. Průtoková cytometrie http://www.flow-cytometry.de/definition.html

22. Fenotypizace lymfocytů • imunodeficience, HIV, imunosuprese, transplantace T lymfocyty CD3+/4+/8+ B lymfocyty CD19+ NK buňky CD3-/16+/56+ IRI - imunoregulační index (CD4/CD8) - nápadně snížený u AIDS, jinak např. u některých virových infekcí aj. - zvýšen bývá u imunopatologických procesů

23. Trombocytární vázané protilátky • protilátky vázané na trombocyty ve tř. IgG a IgM • vyšetření se provádí z plné krve metodou průtokové cytometrie • nacházeny v souvislosti s trombocytopenií jako primární u idiopatické trombocytopenické purpury, jako sekundární u některých autoimunitních onemocnění (SLE, smíšené choroby pojiva), infekčních chorob (především infekce virového původu) a ve spojitosti s některými malignitami (CLL, non-Hodgkin a Hodgkinskými lymfomy)

24. Vyšetření buněčné imunity

25. Blastická transformace lymfocytů • proliferace lymfocytů (blastická transformace) • stimulace mitogenem (antigenem) • PHA, PWM, ConA, PPD, tetanus... • radioizotopová metoda (inkorporace thymidinu do DNA) • pouze v úterý ráno (vyšetření trvá několik dní)

26. Test oxidativního vzplanutí • NBT (nitroblue-tetrazolium chloride test) • chemiluminiscence • CGD

27. Zdroje • Webová prezentace Ústavu imunologie UK 2. LF: imunologie.lf2.cuni.cz • Gavin Spickett: Oxford Handbook of Clinical Immunology, Oxford University Press 2004 • Essentials of Clinical Immunology, 5th edition, Blackwell Publishing, May 2006: www.immunologyclinic.com