Maria Cecília Menks Ribeiro DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA CELULAR, EMBRIOLOGIA E GENÉTICA

1. “Avaliação citogenética e molecular de neoplasias hematológicas – utilização da classificação proposta pela OMS” Maria Cecília Menks Ribeiro DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA CELULAR, EMBRIOLOGIA E GENÉTICA CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINA

2. Metodologia Aplicada Cultura de células leucêmicas de curta duração Análise citogenética clássica (bandas G) Citogenética molecular (FISH) Extração de DNA genômico Extração de RNA RT-PCR

3. Resultados e Comentários 93 amostras coletadas: 56 pacientes com Leucemia Aguda, Linfomas e LMC 38 pacientes com SMD e outras hemopatias. 52 amostras sucesso na análise citogenética clássica : 66% leucemias/linfoma 39% outras hemopatias. desenhadas e analizadas individualmente 781 metáfases em banda G.

4. AVALIAÇÃO CITOGENÉTICA POSSIBILIDADE DE UTILIZAÇÃO DA CLASSIFICAÇÃO PROPOSTA PELA OMS: BOM PROGNÓSTICO LMA t(8;21) (LMA-M2); LPA t(15;17) (LMA-M3); LMA inv(16) (LMA-M4) Alterações adicionais: podem influenciar o prognóstico PROGNÓSTICO INTERMEDIÁRIO: normal, trissomia 8 PROGNÓSTICO DESFAVORÁVEL: 3, -5/del 5q, -7/del7q, cariótipo complexo Além das alterações recorrentes, outras nuances das alterações cariotípicas foram detectadas e seu significado foi sendo interpretado em função da evolução do pacientes.

5. TAMBÉM AVALIADOS PACIENTES COM: LLA- t(8;14) LMC- t (9;22) SMD- presença de alterações cromossômicas x cariótipo normal

6. 15 17 A 15q+ 17q- transl 17 transl 15 Figura 1: A - análise com FISH, metáfase e núcleo interfásico com t(15;17) da amostra 3507; B - Metáfase em bandas G, amostra 3207, com t(15; 17). Padronização da técnica de FISH para detecção de rearranjos em células metafásicas e núcleos interfásicos. B

7. Padronização dos procedimentos para extração de RNA e transcrição reversa (cDNA) para detecção dos genes quiméricos. Opção para diagnóstico em culturas sem crescimento Acompanhamento do tratamento/ Detecção de doença residual

8. Impactos do Projeto A avaliação citogenética para diagnóstico de neoplasias hematológicas possibilita a adequação necessária para a utilização da proposta da OMS para classificação destas neoplasias. Através desta proposta foi possível sua utilização sistemática ( em caráter experimental) de forma pioneira no Hospital Universitário da UFSC, o que permitiu caracterizar a natureza da demanda para esta avaliação na população atendida, estabelecer as alterações mais recorrentes, e também acompanhar a evolução dos pacientes avaliados.

9. ADEQUAÇÃO DA INFRA-ESTRUTURA -sistema de microscopia de fluorescência e fotodocumentação - Micro-centrífuga refrigerada (extração RNA) AQUISIÇÃO DE INSUMOS DE ALTO CUSTO Material descartável Meios de cultura específicos Reagentes para FISH Reagentes para RT-PCR

10. Aplicabilidade para o SUS Disponibilização de metodologias validadas e recomendadas pela OMS para os pacientes atendidos no HU-UFSC Opções terapêuticas baseadas nas alterações cromossômicas Capacitação de profissionais na utilização de metodologias Caracterização das patologias mais freqüentes na população de Santa Catarina

11. IMPORTÂNCIA DA UTILIZAÇÃO DA CLASSIFICAÇÃO DA OMS • diagnóstico • classificação • progressão • escolha terapêutica • detecção de doença residual mínima • evolução