Download
1 / 16
160 likes | 363 Views
Imunohistochemická detekcia proteínu p16 a Ki67 v súvislosti s HR HPV infekciou v štandardnej gynekologickej onkocytológii. J. Bodnár Košice. Incidencia rakoviny krčka maternice. Východná Európa 16,8 Severná Európa 9,8 Južná Európa 10,2 Západná Európa 10,4 Východná Ázia 6,4
E N D
Imunohistochemická detekcia proteínu p16 a Ki67 v súvislosti s HR HPV infekciou v štandardnej gynekologickej onkocytológii. J. Bodnár Košice
Incidencia rakoviny krčka maternice • Východná Európa 16,8 • Severná Európa 9,8 • Južná Európa 10,2 • Západná Európa 10,4 • Východná Ázia 6,4 • Austrália /NZ 7,7 • Stredná Amerika 40,3 • Južná Afrika 30,3
Rizikové faktory cervikálnej neoplázie • V e k / prvý pohlavný styk • V e k (>40 vs 20< • Sexuálny partneri > 2 • Recentný a nechránený pohlavný styk • Promiskuita muža • C e r v i c i t í d a • Genitálne infekcie - H P V (typ 16,18, ...) • Kontraceptíva • Fajčenie
Rizikové skupiny • Sexuálna aktivita/kontakt (orálny, vaginálny a análny pohlavný styk) • Promiskuita/Viac sexuálnych partnerov – zvyšuje riziko nákazy • Adolescenti – vyššie riziko nákazy
Schématické znázornenie vplyvu etiologického agens na sliznicu
Úloha HPV v patogenéze cervikálnej neoplázie Bazálne bunky dlaždicovitého epitelu Včasná proteosyntéza HPV Integrácia do bunkového genómu (HPV 16,18) Epizomálna DNA replikácia Kondylómy alebo low grade SIL (CIN 1) Latentná infekcia Inaktivácia suppresorových génov Kofaktory High grade SIL (CIN 3 ) / INVAZÍVNY KARCINÓM
p16INK4a je proteín s funkciou inhibítora cyklín-dependentných kináz 4/6 (CDK4/6). Komplex cyklín D1-3/CDK4/6 je zodpovedný za progresiu bunkového cyklu z fázy G1 do S (a teda v konečnom dôsledku za proliferáciu), a to prostredníctvom kľúčového pRB proteínu. Strata expresie p16INK4a alebo jeho funkčná inaktivácia, keďže v zásade ide o proteín s funkciou tumor-supresora, bola preukázaná u mnohých druhov nádorov. V kontraste s týmto zistením, u niektorých ďalších nádorov , vrátane ca cervixu uteru, bola dokázaná silná nadexpresia p16INK4a. V tomto prípade ide o asociáciu s HR- HPV infekciou, expresia HR-HPV onkogénnych proteínov E6 a E7 je nevyhnutná pre iniciáciu a udržanie transformovaného fenotypu epiteliálnych buniek v patogenéze ca cervixu. Expresia E7 proteínu má za následok funkčnú inaktiváciu pRB a uvoľnenie E2F, čo vedie k nadexpresii p16INK4a. Zvýšená expresia p16INK4a teda v prípade cervikálnych lézií predstavuje biomarker aktivovanej expresie HR-HPV onkogénov.
Ki-67 je nukleárny proteín s kľúčovou úlohou pri udržiavaní celulárnej proliferácie. Je prítomný vo všetkých fázach bunkového cyklu s výnimkou kľudovej fázy G0. Ki-67 proteín je ubikvitárne prítomná molekula, pričom dosiaľ nie je jasné či sa uplatňuje aj ako jedna z príčin malígnej transformácie, alebo iba ako prostriedok pre zintenzívnenie proliferácie po deregulácii jednej alebo viacerých celulárnych signálnych dráh. Tzv. Ki-67 labelling index (LI), t. j. percento buniek v tkanive pozitívnych pri imunohistochemickom vyšetrení na Ki-67 antigén, indikuje rastovú (proliferačnú) frakciu. U mnohých malignít, napr. malígnych lymfómov, ca prsníka, ovária a prostaty indikuje vysoký LI zlú prognózu, resp. je asociovaný s progresiou ochorenia, využíva sa tiež na odlíšenie benígnych a malígnych lézií. Expresia Ki-67 teda slúži ako prognostický marker.
Dysplázia v cytologickom obraze High grade SIL – CIN 3 - ťažká dysplázia Low grade SIL – CIN 1 - ľahká dysplázia
Odber materiálu na imunocytochemické vyšetrenie • Výter z krčka maternice Cytobrush sa „vytrepe“ v transportnej skúmavke, aby sa bunky uvoľnili do transportného média • Takto získaný materiál centrifugujeme na cytospine • Pripravený preparát ďalej spracovávame štandardným imunocytochemickým postupom
